一、鄰位連接適用的最短和最長距離是多少？
所有的Duolink® PLA產品都是被設計用于鄰位檢測的。當使用二抗方法時，理論上在兩種靶標蛋白（表位）間產生信號的最長距離為40 nm。這些數據是基于抗體的平均直徑約為10 nm而計算出來的。Duolink® PLA理論上可檢測距離在0 nm之內的兩個表位，只要兩種單抗可發生結合并且不存在位阻。

二、Duolink® PLA產品或試劑可持續多久？

1.檢測試劑盒中的所有試劑必須總是被保存在-20 °C。這一點對于連接酶和聚合酶尤為重要，它們如果被拿出冰箱后需要被保存在預冷的冷凍模塊中（冷凍模塊可保持酶處在-20 °C；而冰浴并不能實現這一點）。Duolink® PLA探針、抗體稀釋液、封閉液以及封片液必須被保存在+4 °C。不要將PLA探針或由Probemaker生成的探針進行冷凍。

2.只要保存在-20 °C，我們可在您收到Duolink® PLA Probemaker后提供6個月的保障。一旦發生偶聯后，我們的經驗是絕大多數抗體在+4 °C的有效期為三至六個月。這種情況下，它將非常依賴于抗體是否需要特殊的保護劑。

三、是否可以將Duolink® PLA用于活細胞或非固定的組織樣品？

1.Duolink® PLA一直是針對固定細胞和組織而優化的。

2.通透化對于抗體和探針找尋到其靶標是必需的。

3.此外，一些Duolink® PLA試劑（酶、DNA寡核苷酸）可能會被活細胞中活性機制所摧毀。

四、是否可以將PLA探針與傳統的免疫熒光結合使用？

是的。  只要所有的抗體來自不同的物種并且熒光檢測系統使用的是不同顏色的熒光，就可以將Duolink® PLA探針與傳統的免疫熒光技術結合使用。